一、關于Matrixome

在細胞培養(yǎng)的漫長歷史里，研究者們一直在和一件事較勁——細胞貼在什么上面，才足夠像體內環(huán)境？

早期的方案是用小鼠腫瘤來源的Matrigel，或者用飼養(yǎng)層細胞（feeder layer）來提供附著信號。但這些方案的問題也很明顯：成分不明確、批次波動大、攜帶動物源病原體風險、難以標準化。對于需要往臨床方向走的干細胞研究來說，這些不確定性是一道持續(xù)的阻力。

Matrixome正是從這個問題出發(fā)建立起來的。

公司的學術根基來自日本大阪大學Kiyotoshi Sekiguchi教授實驗室十余年對細胞外基質（Extracellular Matrix, ECM）——尤其是層粘連蛋白（Laminin）分子家族的結構與功能研究。"Matrixome"（基質組）這個詞本身也是由該實驗室提出的概念，用來指代ECM中構成某一特定細胞類型定制化微環(huán)境的全部分子集合，是蛋白質組的一個功能子集。

將學術上對Laminin分子結構的精細拆解轉化為可用的培養(yǎng)底物，就是Matrixome做的事情。其核心產(chǎn)出是一系列以iMatrix™為品牌名的重組層粘連蛋白E8片段產(chǎn)品——用人為表達、可純化、可定量的方式，把天然基底膜中最關鍵的細胞粘附信號，單獨拿出來交給研究者使用。

這里值得強調的是：Matrixome走的是一條重組蛋白路線，而非組織提取物路線。也就是說，每一批次產(chǎn)品的活性成分是什么、濃度是多少、雜質控制到什么水平，都可以用生化方法界定。這從根本上改變了"基質膠"這類產(chǎn)品在實驗中的角色——從一種經(jīng)驗性的黑色盒子，變成一種可標準化的試劑。

?? 下圖為上海起發(fā)實驗試劑有限公司作為日本Matrixome授權代理商的授權書

二、核心優(yōu)勢——為什么越來越多實驗室從傳統(tǒng)基質膠轉向iMatrix

2.1 明確成分 vs. 不明混合物

傳統(tǒng)基底膜提取物（如Matrigel）是從Engelbreth-Holm-Swarm小鼠腫瘤中提取的復合物，其中除了層粘連蛋白、膠原IV、巢蛋白（nidogen）等預期成分外，還混雜著大量生長因子、蛋白酶、黏蛋白和其他未表征的分子。不同批次之間，這些伴生成分的相對豐度會漂移，導致同樣的實驗在不同時間做出來的結果對不上。

iMatrix系列每一個品項都是單一重組蛋白——具體地說，是某一種人源層粘連蛋白異聚體的E8片段。表達系統(tǒng)以CHO-S細胞為主（部分品項采用轉基因蠶系統(tǒng)），最終制劑中除了緩沖液鹽類之外，活性成分只有目標Laminin E8片段。你寫在論文Materials and Methods里的"coating substrate"，終于可以精確到分子量、純度、濃度和批號可追溯性。

2.2 無動物源（Xeno-free）路徑

所有iMatrix品項的表達和純化過程不依賴小鼠或其他動物組織。對于涉及臨床前開發(fā)、細胞治療工藝、或任何需要考慮異種污染風險的場景，這一點是材料合規(guī)鏈條上的重要環(huán)節(jié)。即使你的研究目前還在純探索階段，養(yǎng)成使用成分明確的無動物源試劑的習慣，也為將來可能的轉化路徑減少了一道替換試劑的變量。

2.3 E8片段策略——只保留需要的那一段

天然層粘連蛋白是全長的異源三聚體（大約400–900 kDa，依亞型而定），包含多個結構域，其中一部分負責自組裝成網(wǎng)狀基底膜、一部分與細胞結合、一部分與其他ECM組分交聯(lián)。但在二維細胞培養(yǎng)場景下，細胞真正用來"抓住"基底的，主要是整合素結合區(qū)域。

Sekiguchi團隊的工作證明：Laminin-511的E8片段（約150 kDa）已經(jīng)包含了足夠的整合素結合位點（主要通過α6β1和α3β1等整合素），能夠以接近全長蛋白的效率支持細胞粘附與鋪展，同時因為分子更小、少了大量無關結構域，在表達產(chǎn)率、溶解穩(wěn)定性、純化均一性上都更有優(yōu)勢。

所以iMatrix系列本質上做的是減法——不是把整個基底膜搬進培養(yǎng)皿，而是把其中最關鍵的"粘合力"提取出來，做成可精確計量的形式。

2.4 批次一致性

重組表達體系加上明確的純化規(guī)格意味著：同一品項的不同批次之間的差異，主要落在可控的生化質控范圍內（純度、濃度、整合素結合活性Kd值等），而不是落在未知伴隨分子的波動上。這對于需要多次獨立重復、或需要在不同實驗室間復現(xiàn)的實驗體系尤為關鍵。

2.5 靈活的工作流程——支持預包被法，也支持預混法（Pre-Mix）

多數(shù)iMatrix品項既可以選擇傳統(tǒng)預包被（pre-coating）方式使用，也支持預混法（Pre-Mix Method）——即不提前包被培養(yǎng)板，而是把iMatrix稀釋液直接和細胞懸液一起加到孔里，讓包被與細胞接種同步發(fā)生。預混法不僅省掉包被→吸液→晾干的步驟，還減少了操作過程中的污染機會和試劑損耗。

三、熱門產(chǎn)品介紹

═══ 產(chǎn)品① iMatrix-511 ═══

? 品名

iMatrix-511（重組人層粘連蛋白-511 E8片段 / Recombinant Human Laminin-511 E8 Fragment）

? 產(chǎn)品概述

iMatrix-511是Matrixome具代表性的品項，也是目前文獻中出現(xiàn)頻次最高的重組Laminin E8產(chǎn)品之一。它由CHO-S細胞表達，經(jīng)過高度純化精制，制劑形式為液體，典型濃度為0.5 mg/mL（500 μg/mL），溶劑體系通常為不含Ca2?/Mg2?的PBS。

? 為什么是Laminin-511

在人體胚胎發(fā)育和組織穩(wěn)態(tài)中，層粘連蛋白-511是早期基底膜的關鍵組成成分。對人多能干細胞（hPSCs，包括hESCs和hiPSCs）而言，細胞表面的主要粘附受體之一是整合素α6β1，而Laminin-511正是α6β1的高親和力配體之一。這就是為什么在feeder-free培養(yǎng)體系里，Laminin-511（或其E8片段）能夠充當hPSC的自我更新維持底物。

? 產(chǎn)品特點

● 單一活性成分，成分明確，非提取物  

● 無動物源成分，適合對xeno-free有要求的培養(yǎng)體系  

● 高純度制劑（文獻和廠商QC通常以>95%純度為目標，通過SDS-PAGE等方式表征）  

● 以液體形式提供，開瓶后可直接稀釋使用，減少稱量/重溶帶來的操作誤差  

● 支持低密度單細胞接種——細胞仍能保持較高的克隆存活率和遷移-鋪展能力，逐步匯合形成緊密單層  

● 與多種常見hPSC系兼容，在長期傳代中可以維持多能性標記表達和核型穩(wěn)定性（具體表現(xiàn)依細胞系和配套培養(yǎng)基而定）

? 存儲條件

● 推薦存儲溫度：2–8 °C（即4 °C冰箱）  

● 需避光保存（鋁箔包裹或原包裝盒內儲存即可）  

● 避免反復凍融——取出所需用量后盡快放回，操作時盡量在冰上短暫放置  

● 在正確存儲條件下，自生產(chǎn)日期起穩(wěn)定期可達約2年（具體以隨瓶標示的有效期為準）  

● 一旦開封，按照良好實驗室操作規(guī)范在無菌條件下取用，盡量減少瓶口暴露時間

? 工作原理

iMatrix-511的E8片段包含了Laminin-511的C末端球狀結構域中負責整合素識別的關鍵位點，其中核心的結合對象包括整合素α6β1。當把iMatrix-511鋪在培養(yǎng)板表面時（無論是預包被還是預混法原位吸附），E8片段通過靜電和疏水作用附著在聚苯乙烯/玻璃等固相表面，將其整合素結合界面朝外露出。懸浮的hPSC通過表面整合素與之結合→激活FAK/Src等粘附信號通路→細胞鋪展、形成焦點粘附（focal adhesion）→下游PI3K/Akt、MEK/ERK等通路維持在適合自我更新的狀態(tài)（前提是培養(yǎng)基中的可溶性因子——如bFGF/Activin A等——也配合到位）。

簡言之：iMatrix-511做的是提供一個確定的"地面信號"，讓本來需要靠飼養(yǎng)層細胞或復雜提取物才能安頓下來的干細胞，直接在工程化的底物上完成粘附和維持。

? 使用方法（兩種常規(guī)方式）

── 方法A：預包被法（Pre-coating）

1. 將0.5 mg/mL儲備液用無菌PBS(-)稀釋至工作濃度。常用包被密度約為0.25 μg/cm2（例如6孔板的單孔面積約9.6 cm2，對應約2.4 μg iMatrix-511；實際操作上常按體積換算：加1 mL稀釋后的2.5 μg/mL工作液到每孔）。

2. 室溫放置約1小時，或37 °C孵育約1小時，或4 °C過夜均可（依實驗室習慣調整）。

3. 包被完成后，吸去多余液體（通常不要求額外沖洗），立即加入細胞懸液與培養(yǎng)基。注意不要等包被面干透。

4. 后續(xù)細胞傳代時可用Accutase或合適的解離試劑分散為小細胞團/單細胞，再接種到新鮮包被的板上。

── 方法B：預混法（Pre-Mix / Without Pre-coating）

1. 按終濃度約0.25 μg/cm2計算所需iMatrix-511體積（例如6孔板終濃度對應約5 μL的0.5 mg/mL儲備液溶于該孔總培養(yǎng)基體積中）。

2. 將iMatrix-511加入已含培養(yǎng)基的無菌離心管或直接加入孔中混勻，再放入細胞懸液。

3. 此法的好處是整個過程少一步開蓋操作和一次孵育等待，尤其適合一次處理多塊板或多孔板的場景。

注：具體工作濃度可根據(jù)細胞系響應微調。部分實驗室在使用預混法時也會略微提高終濃度以確保初次接種的貼壁效率。建議新用戶在正式實驗前做一次貼壁效率的濃度梯度測試（如0.1–1.0 μg/cm2范圍），找到所用細胞系的最佳窗口。

═══ 產(chǎn)品② iMatrix-511 silk ═══

? 品名

iMatrix-511 silk（轉基因蠶表達的人層粘連蛋白-511 E8片段）

? 產(chǎn)品概述

這是iMatrix-511的功能同源變體，區(qū)別在生產(chǎn)平臺。iMatrix-511 silk將人Laminin-511 E8片段的基因導入家蠶繭絲腺表達系統(tǒng)中，從蠶絲腺純化得到產(chǎn)物。經(jīng)功能檢測，其整合素結合活性與CHO-S細胞表達的iMatrix-511在同一量級，同樣可用于iPS/hPS細胞系的維持與擴增。

? 產(chǎn)品特點

● 功能上與iMatrix-511對標，同樣的E8片段序列，同樣的整合素結合特異性  

● 蠶絲生物反應器系統(tǒng)的規(guī)模放大潛力使得單位產(chǎn)量成本有更大的下降空間，這在需要大量包被面積（如規(guī)?；瘮U增、工藝開發(fā)、較大規(guī)模分化前的種子擴增）時體現(xiàn)價值  

● 同樣為無動物源成分、成分明確的單一蛋白制劑  

● 液體形式，同樣為約0.5 mg/mL級別的典型濃度

? 存儲條件

與iMatrix-511相同：2–8 °C，避光，避免反復凍融，穩(wěn)定期約2年（以瓶標為準）。

? 工作原理

同iMatrix-511——E8片段提供α6β1整合素配體，介導hPSC粘附與信號輸入。蠶絲來源的差異體現(xiàn)在糖基化模式等翻譯后修飾上（蠶的糖基化譜系與哺乳動物不同），但核心的結合結構域是同一段人源序列，因此在大多數(shù)貼壁信號層面功能等效。

? 使用方法

與iMatrix-511全一致——可選擇預包被法或預混法，常用終濃度也落在相近范圍（如0.25 μg/cm2量級），具體以當批的COA中給出的建議濃度為初始參考。

═══ 產(chǎn)品③ iMatrix-511 MG ═══

? 品名

iMatrix-511 MG（Magna Grade / 大包裝級 重組人層粘連蛋白-511 E8片段）

? 產(chǎn)品概述

iMatrix-511 MG是為更大規(guī)模培養(yǎng)需求準備的配置版本——同樣的活性成分（Laminin-511 E8片段），但在包裝規(guī)格和濃度設計上更面向需要反復、大面積包被的用戶。適合細胞治療工藝開發(fā)實驗室、需要大量hPSC擴增的平臺、以及希望把日常傳代流程標準化為固定體積的實驗室。

? 產(chǎn)品特點

● 與iMatrix-511相同的重組Laminin-511 E8片段，同樣的整合素結合活性  

● 更大包裝量（常見為1,050 μg級，即175 μg×6管的配置），減少頻繁開新瓶的次數(shù)  

● 維持無動物源、成分明確、批次可追溯的特性  

● 適合長期項目——一瓶就能覆蓋數(shù)十次傳代的常規(guī)用量（依板面積和每次消耗量而定）

? 存儲條件

2–8 °C，避光保存，避免反復凍融，自生產(chǎn)日起穩(wěn)定約2年。由于單次取用量可能更大，建議在無菌超凈臺內分裝為工作 aliquot 的操作流程，以減少主瓶被反復暴露于室溫/空氣的風險。

? 工作原理 / 使用方法

與前述iMatrix-511相同。MG后綴主要是規(guī)格定位差異（量更大、面向更高通量和更大面積），而非機制上的新東西。如果你的實驗室每周要做多塊6孔板或更大面積的hPSC傳代，MG版本的包裝效率會更友好。

四、這些產(chǎn)品解決了實驗中的哪些具體問題

問題①：傳統(tǒng)基質膠的批次波動讓實驗復現(xiàn)變得困難

你可能有過這樣的經(jīng)歷：三個月前做的干細胞傳代穩(wěn)穩(wěn)的，換了新一批Matrigel之后，貼壁效率掉了、形態(tài)變了、分化標記飄了。原因往往不在你的細胞也不在你的培養(yǎng)基，而在那個成分未定義的提取物里某幾個伴生成分的比例悄悄變了。

iMatrix的應對方式是：用重組單一蛋白替代提取物。批間差異從"未知成分的各種漂移"收斂為"同一個蛋白的純度/濃度/活性的可測定偏差"。寫論文時你也可以更踏實地寫 "cells were cultured on plates coated with recombinant human laminin-511 E8 fragment (iMatrix-511, Matrixome)"——審稿人看到的是一條可追溯的材料鏈。

問題②：動物源提取物與臨床轉化路徑之間的鴻溝

如果項目目標是往細胞治療、移植、臨床前GLP毒理或任何需要材料合規(guī)的方向走，那么小鼠腫瘤來源的提取物遲早要被替換。iMatrix從一開始就是無動物源重組蛋白路線，省掉了"以后還得重新驗證一遍"的隱患。

問題③：飼養(yǎng)層細胞操作繁瑣且引入額外變量

MEF（小鼠胚胎成纖維細胞）飼養(yǎng)層雖然能維持hPSC，但需要輻照處理、需要定期制備、批次間質量不一、且始終存在動物源交叉污染的可能。換成iMatrix-511 + 合適無血清培養(yǎng)基的組合，可以把體系精簡為：確定的底物 + 確定的可溶性因子，操作上少養(yǎng)一種細胞、少做一次處理、少管一套質控。

問題④：包被步驟耗時、容易干、增加污染風險

預混法（Pre-Mix）的價值就在這里。不需要提前一小時包被、不需要吸液、不需要擔心包被面干掉。把iMatrix稀釋液直接加入培養(yǎng)基/細胞懸液中，一起加到孔里，讓它邊吸附邊讓細胞落上去。流程從多步變少步，對高通量操作尤其友好。

問題⑤：低密度接種或單細胞克隆時細胞存活率低

hPSC在單細胞離散后容易經(jīng)歷 anoikis（失粘附凋亡），通常需要ROCK抑制劑（如Y-27632）來幫助過渡。iMatrix-511的底物信號強度足夠，在不少細胞系中可以支撐低密度單細胞接種并獲得克隆存活，但仍需提醒：是否需要ROCKi仍然取決于你的細胞系和培養(yǎng)基配方，不是所有情境都能省掉。iMatrix提供的是更好的"地面"，但"營養(yǎng)液"那邊也要配平。

問題⑥：你研究的細胞不是hPSC，但也不知道該用什么底物

這時iMatrix-Palette或分批試用不同亞型（511→411→332→221）的思路就派上用場。不同組織細胞在體內的"地板材質"本就不同——血管內皮更多看到411，表皮和角膜上皮更多看到332，肌源性區(qū)域更多看到221/211。與其猜，不如用確定的底物做并行對比，讓細胞自己告訴你答案。

五、購買與使用中的常見疑問——Q & A

Q1：iMatrix-511 和 iMatrix-511 silk 應該怎么選？

A： 兩者的核心活性成分都是人Laminin-511 E8片段，功能上對標同一用途（hPSC/ES細胞feeder-free維持、貼壁擴增）。如果你關注的是單次用量不大、想用文獻支持的版本，選iMatrix-511（CHO-S表達）即可。如果你的用量偏大、或你在做工藝規(guī)模的評估想看成本結構，可以并行測試iMatrix-511 silk——它的表達平臺不同（蠶），單價結構可能更有彈性，但如果你做非常嚴格的細胞系表征，建議先做平行比對確認在你所用的細胞系和培養(yǎng)基組合下兩者給出一致的 karyotype/多能性/分化潛能結果。

Q2：第一次用iMatrix，包被濃度怎么定？

A： 一個穩(wěn)妥的起步參考是0.25 μg/cm2（折算下來，6孔板單孔約需2.4 μg，用1 mL工作液則對應2.5 μg/mL稀釋濃度；若直接從0.5 mg/mL儲備液取，則是約4.8 μL到1 mL PBS中做工作液再包被）。但這是通用起點而非鐵律——不同細胞系、不同接種密度、不同板材質（細菌級PS vs. 組織級TC vs. 未包被PS）都會影響有效劑量。建議花半天做一組梯度（比如0.1 / 0.25 / 0.5 / 1.0 μg/cm2），讀4小時貼壁率和24小時形態(tài)，選經(jīng)濟的足量濃度。

Q3：預混法（Pre-Mix）真的不會讓iMatrix被稀釋到無效嗎？

A： 預混法之所以可行，是因為E8片段對培養(yǎng)板表面的吸附動力學足夠快——在通常的培養(yǎng)基體積/表面積比例下，終濃度0.25 μg/cm2級的iMatrix在加入后較快地部分吸附到塑料表面形成功能層，同時培養(yǎng)基中殘留的游離片段也持續(xù)供應結合位點。實際操作中多數(shù)實驗室報告的貼壁效率和預包被法相當。但如果你用的是超低吸附板、或培養(yǎng)基體積異常大（表面積/體積比太?。?，預混法的效果可能會打折扣——這種邊界條件下仍建議用預包被法。

Q4：iMatrix收到后要放哪里？能凍嗎？

A： 存儲條件是2–8 °C（4 °C冰箱）。不要放到-20 °C去"凍存延長壽命"——反復凍融和蛋白質冷變性的風險遠大于收益。如果一瓶用量較大、你擔心頻繁開蓋影響穩(wěn)定性，可在超凈臺內預先分裝為若干aliquot（按每次傳代大約消耗的體量分），主瓶盡量少開。分裝時注意使用無菌低蛋白吸附管、操作時放冰上、盡快放回4 °C。

Q5：iMatrix能用在96孔板里做高通量篩選嗎？

A： 可以。包被邏輯一樣——按每孔底面積折算所需μg數(shù)。但要注意：96孔板的邊緣效應會比6孔板顯著得多，包被時建議用多通道移液器或試劑儲液槽保證每孔體積均一，包被孵育時板不要放在通風處（防邊緣蒸發(fā)導致的濃度梯度）。做完包被后不要晾乾——這一點在任何孔板尺寸都成立，96孔因為體積小更敏感。

Q6：我的細胞在iMatrix-511上貼不住，可能是什么原因？

A： 按順序排查以下幾項：① 你用的板是否是未包被的普通PS而非TC-treated？——絕大多數(shù)情況下iMatrix對未包被PS也能吸附，但TC板更穩(wěn)定，建議用TC-treated確保一致性。② 包被濃度是否太低——嘗試提高到0.5或1.0 μg/cm2看是否有改善。③ 細胞解離是否過度——Accutase通常比trypsin溫和，但無論哪種，解離時間過長都會把整合素本身切掉導致暫時無法粘附；可測一下不同解離時間的活率。④ 培養(yǎng)基中是否有高濃度競爭性肽段/螯合劑/干擾離子——罕見但值得檢查。⑤ 確認你買的確實是511而非其他亞型——有些細胞就是對511響應弱但對332或411強。

Q7：iMatrix能和Matrigel混合使用嗎？

A： 技術上你可以把兩者疊加包被，但從"成分明確"的角度來說，加Matrigel等于又把不明混合物引回來了，抵消了iMatrix的核心優(yōu)勢。更合理的做法反而是：如果你發(fā)現(xiàn)iMatrix-511單獨不夠，先嘗試調包被濃度、調接種密度、檢查培養(yǎng)基因子配方（bFGF濃度、Akt通路支持等），或在iMatrix框架內換亞型（Palette思路），而不是直接退回到提取物疊加。

Q8：能用于體內實驗嗎？

A： iMatrix系列的標準產(chǎn)品標識為 For research use or further manufacturing use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures administered to humans. 任何涉及體內給藥或臨床用途的考慮都必須從合規(guī)渠道確認對應品項是否有符合GMP/xeno-free認證的分支產(chǎn)品線以及完整的監(jiān)管文件鏈條。常規(guī)實驗室級iMatrix不直接等同于可用于人體的材料。

Q9：運輸途中會不會失活？

A： 正常冷鏈運輸（冰袋或冷藏箱，途中維持在合理低溫區(qū)間）對iMatrix的穩(wěn)定性不構成挑戰(zhàn)——它在4 °C的穩(wěn)定期是以"年"計的。收到后第一時間檢查包裝是否完好、是否仍在冷鏈狀態(tài)，然后存入4 °C。如果運輸延誤導致產(chǎn)品長時間處于室溫以上（尤其夏天在無保冷情況下多日高溫），再考慮聯(lián)系供應商核查。正常使用場景下，短途運輸?shù)臏囟炔▌硬粫屗А?/span>

Q10：我想用iMatrix做長期傳代，多久需要重新包被？

A： 包被是一次性的——你包好板、接種、養(yǎng)到匯合、消化傳代到新包被的板上。iMatrix不像涂層聚合物那樣"粘在表面不放"，每次換新板/新孔都需要重新包被（或改用預混法在新孔里直接加）。好在包被操作簡單，熟練之后每塊板的"底物準備"時間也就一兩分鐘。

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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）

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