KlenTaq-S測序酶是經(jīng)蛋白質(zhì)工程定向改造的耐熱DNA聚合酶,整合了TaqDNA聚合酶的高效聚合活性與片段的校對活性,專為Sanger雙脫氧鏈終止法測序場景優(yōu)化,解決了傳統(tǒng)測序酶存在的峰圖噪音高、錯配率高、復(fù)雜模板延伸效率低等痛點,是分子生物學(xué)檢測領(lǐng)域常用的測序工具酶。
KlenTaq-S測序酶的催化功能核心特點:
1.鏈延伸效率高:能夠高效識別熒光標(biāo)記的ddNTP和dNTP底物,按照模板鏈的堿基序列完成互補鏈的合成,對富含GC、存在二級結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板也有較好的延伸耐受性,不易在復(fù)雜結(jié)構(gòu)位點停滯。
2.錯配校正能力:保留的3'→5'外切酶活性可識別并切除錯配摻入的核苷酸,大幅降低堿基錯配概率,提升測序結(jié)果的準(zhǔn)確性;缺失的5'→3'外切酶活性則避免了標(biāo)記底物被降解,保障信號輸出的完整性。
3.底物兼容性強:適配常規(guī)熒光標(biāo)記ddNTP體系,無需調(diào)整底物配方即可兼容主流Sanger測序反應(yīng)體系,降低了使用門檻。
測序場景的專屬優(yōu)勢:
1.峰圖質(zhì)量優(yōu)異:測序輸出的峰圖背景噪音低,峰形銳利,信號區(qū)分度高,即使是在測序末端的低信號區(qū)域也能清晰分辨堿基信號,大幅降低人工判讀的錯誤率。
2.長讀長支持能力:單次反應(yīng)可完成更長片段的延伸,減少了短讀本的比例,對于長片段克隆驗證、大片段基因突變篩查等場景的適配性更強,降低了重復(fù)測序的成本。
3.復(fù)雜模板適配性好:相比傳統(tǒng)測序酶,對高GC區(qū)域、短串聯(lián)重復(fù)序列、發(fā)夾結(jié)構(gòu)等復(fù)雜模板的延伸成功率更高,減少了樣本重測的比例,提升了測序通量。
KlenTaq-S測序酶的應(yīng)用場景:
1.基礎(chǔ)科研場景:廣泛用于質(zhì)粒測序、克隆插入片段驗證、定點突變確認(rèn)、基因編輯效果驗證等常規(guī)分子生物學(xué)實驗,操作流程與通用測序體系一致,無需額外優(yōu)化實驗條件。
2.臨床檢測場景:適配遺傳病致病基因篩查、病原體分型檢測、腫瘤相關(guān)基因突變檢測等對準(zhǔn)確性要求較高的臨床檢測項目,低錯配率為檢測結(jié)果的可靠性提供了保障。
3.法醫(yī)鑒定場景:能夠穩(wěn)定讀取微量、降解樣本的核酸序列信息,為法醫(yī)個體識別、親緣關(guān)系鑒定、陳舊樣本溯源等場景提供穩(wěn)定的技術(shù)支撐。